Подготовительный этап: декальцинация
Перед тем как приступить к окрашиванию гистологического препарата, твердый материал необходимо правильно подготовить. Костная ткань обладает высокой плотностью из-за массивного отложения неорганических соединений.
Для того чтобы препарат можно было нарезать и качественно изучить под микроскопом, проводится процедура декальцинации. Этот процесс представляет собой размягчение кости при помощи различных кислот. Воздействие кислой среды приводит к растворению и полному удалению солей кальция из матрицы, при этом органическая основа ткани сохраняет свою первоначальную структурную целостность. Без этого этапа адекватное выявление микроскопических элементов было бы невозможным.
Специфика метода Шморля
Основным инструментом для выявления тонких элементов костной ткани в данном случае выступает окраска по методу Шморля. В качестве главного красящего вещества используется раствор тионина.
Тионин вступает во взаимодействие с определенными компонентами ткани, обеспечивая четкую контрастность различных зон препарата. Главная мишень для этого красителя — коллагеновая выстилка, которая выстилает внутренние поверхности микроскопических пространств внутри кости. Именно благодаря избирательному связыванию тионина с коллагеновыми волокнами этих зон, метод Шморля считается стандартом для демонстрации архитектуры костных полостей.
Интерпретация микроскопической картины
Классическим объектом для исследования данным методом служит трубчатая кость. При изучении готового препарата под световым микроскопом визуализируется следующая картина:
- Темно-коричневый цвет: в этот насыщенный оттенок окрашиваются стенки костных полостей (так называемых лакун), а также стенки отходящих от них тончайших канальцев. Интенсивная окраска обусловлена присутствием коллагеновой выстилки.
- Светло-коричневый цвет: служит фоном препарата. В такой более бледный оттенок окрашивается основное межклеточное вещество костной ткани.
Морфологически на препарате четко видна целая система взаимосвязанных структур. В первую очередь, это сами костные полости, которые в живой ткани служат вместилищем для клеток — остеоцитов. От этих лакун радиально отходит сеть костных канальцев. В этих узких ходах располагаются отростки клеток. Визуально весь этот комплекс воспринимается как характерные темные отростчатые структуры, контрастно выделяющиеся на общем светло-коричневатом фоне межклеточного матрикса.
Для запоминания цветов по Шморлю: «Шморль пьет крепкий чай» — фон светло-коричневый (как слабый чай), а стенки лакун и канальцев — темно-коричневые (как крепкая заварка).
Вопросы с занятий и экзамена
Для чего проводится декальцинация кости перед окраской?
Декальцинация необходима для размягчения костной ткани. Кислоты удаляют соли кальция, что позволяет сделать тонкие срезы и качественно окрасить препарат.
Какой краситель используется в методе Шморля?
В методе Шморля применяется раствор тионина.
Что именно приобретает темно-коричневую окраску на препарате?
Темно-коричневым цветом окрашиваются стенки костных лакун и канальцев благодаря наличию в них коллагеновой выстилки.
Какие клеточные структуры располагаются в видимых полостях и канальцах?
В самих костных полостях (лакунах) лежат клетки — остеоциты, а в отходящих от них канальцах проходят клеточные отростки.
Что ещё разобрать по теме
- Организация межклеточного вещества трубчатой кости
- Строение и функции остеоцитов
- Химические основы взаимодействия тионина с коллагеном
- Сравнение трубчатой, губчатой, плоской и смешанной костей на гистологическом уровне
- Альтернативные методы окраски декальцинированных тканей
Разберите тему целиком в курсе «Гистология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Выявление элементов костной ткани» и ещё 3 438 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 137 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Техника гистологического исследования»
Бесплатные видеоуроки: гистологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.