Виды хроматографии в диагностике
В лабораторной практике применяется целый спектр хроматографических подходов. Среди них выделяют:
- Газожидкостную хроматографию (ГЖХ) — основной инструмент для поиска летучих соединений.
- Высокоэффективную жидкостную хроматографию.
- Газовую хроматографию.
- Тонкослойную хроматографию.
Каждый из этих вариантов направлен на разделение сложных смесей веществ, присутствующих в биологическом материале, однако именно ГЖХ нашла широкое применение в рутинной экспресс-диагностике специфических инфекций.
Газожидкостная хроматография (ГЖХ)
Этот метод стал золотым стандартом для экспресс-диагностики анаэробной инфекции.
Принцип действия основан на хроматографическом выявлении специфических продуктов метаболизма бактерий непосредственно в исследуемом материале. Микроорганизмы в процессе своей жизнедеятельности выделяют определенные вещества, которые можно зафиксировать аппаратно.
Главными метаболическими маркерами наличия анаэробов выступают летучие жирные кислоты. Обнаружив их в образце с помощью ГЖХ, врач-микробиолог может с высокой долей уверенности подтвердить присутствие анаэробной флоры, не дожидаясь результатов длительного культурального посева.
Лазерно-флюоресцентный экспресс-метод
Альтернативный физико-химический подход опирается на оптические свойства биологических объектов. Принцип действия метода включает три ключевых этапа:
- Облучение клинического материала направленным лазерным пучком.
- Регистрация собственной флюоресценции (так называемой аутофлюоресценции) исследуемого материала.
- Анализ спектра свечения. Этот спектр считается уникальным для большинства известных микробов, а также для продуктов их жизнедеятельности.
Метод активно применяется при гнойно-воспалительных заболеваниях и различных дисбиозах. Особую ценность он представляет при стоматологической патологии, помогая в диагностике кариеса и пародонтита. Кроме того, оценка флюоресценции используется для прогнозирования эффективности назначенного лечения.
Несмотря на технологичность, у метода есть существенный недостаток — низкая специфичность. Прибор фиксирует свечение, но не всегда способен точно дифференцировать близкородственные виды микроорганизмов (в отличие от методов, направленных на строгую идентификацию возбудителя, определение вирусной нагрузки или классическую оценку чувствительности к антибиотикам).
Для запоминания маркеров ГЖХ: «Анаэробы Летят Жирными Кислотами» (ЛЖК — летучие жирные кислоты).
Вопросы с занятий и экзамена
Для чего в первую очередь применяется газожидкостная хроматография?
ГЖХ используется для экспресс-диагностики анаэробной инфекции путем выявления летучих жирных кислот в материале.
На чем основан принцип лазерно-флюоресцентного метода?
На облучении материала лазером и последующей регистрации уникального спектра собственной аутофлюоресценции микробов.
Каков главный недостаток лазерной флюоресценции?
Метод обладает низкой специфичностью, что ограничивает его применение для точной идентификации конкретного возбудителя.
Что ещё разобрать по теме
- Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
- Газовая и тонкослойная хроматография: отличия от ГЖХ
- Методы оценки чувствительности бактерий к антибиотикам
- Подходы к идентификации возбудителя и определению вирусной нагрузки
Разберите тему целиком в курсе «Микробиология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Физико-химические методы диагностики» и ещё 4 383 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 141 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Микробиологическая диагностика»
Бесплатные видеоуроки: микробиологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.