Микроскопический метод диагностики

Общая характеристика микроскопического метода

Суть данного подхода заключается в непосредственном визуальном исследовании взятого образца с применением различного увеличительного оборудования. В зависимости от целей исследования и типа микроорганизма могут использоваться разные виды микроскопии:

• Световая микроскопия (наиболее распространенный, рутинный вариант).
• Фазово-контрастная микроскопия.
• Темнопольная микроскопия.
• Люминесцентная микроскопия.
• Электронная микроскопия.

Основными задачами микроскопического метода являются констатация факта наличия или полного отсутствия микроорганизмов в клиническом образце, а также детальное определение морфологических признаков выявленного возбудителя.

У этого подхода есть очевидные преимущества. В первую очередь, это простота исполнения и экономичность. Кроме того, метод отличается быстротой, что делает его незаменимым для экспресс-диагностики (ответ можно получить в тот же день). Однако присутствуют и серьезные недостатки. К причинам частых диагностических ошибок относят субъективность оценки препарата врачом-лаборантом и высокий риск получения ложноотрицательных результатов, если концентрация возбудителя в материале слишком мала.

Бактериоскопический метод

Бактериоскопия направлена на диагностику бактериальных инфекций. Ее суть заключается в предварительном окрашивании бактериальных клеток для последующего изучения их морфологических и тинкториальных свойств (то есть способности структур клетки воспринимать различные красители).

В ходе исследования лаборант оценивает форму клеток, их точный размер, а также характерное взаимное расположение. Например, бактерии могут располагаться цепочками (что типично для стрептококков), в виде «виноградных гроздей» (стафилококки) или парами (диплококки).

Для выявления определенных структур микроорганизма применяются специфические методы окраски:

• По Граму: основной метод, позволяющий оценить свойства клеточной стенки.
• По Бурри-Гинсу: используется для выявления наличия капсулы.
• По Ауески: помогает обнаружить бактериальные споры.
• Серебрение по Морозову и окраска по Леффлеру: предназначены для визуализации жгутиков.
• По Нейссеру: применяется для обнаружения зерен волютина.

Ограничения метода: Бактериоскопия обладает высоким порогом чувствительности (требуется концентрация от 1 тысячи до 100 тысяч клеток на миллилитр) и низкой специфичностью (около 20–80%). Из-за морфологического сходства многих бактерий результат часто носит лишь ориентировочный характер.

Тем не менее, метод достоверен, если микроб обладает уникальной морфологией, а у пациента наблюдается характерная клиническая картина. Отличными примерами эффективного применения служат диагностика туберкулеза (поиск кислотоустойчивых палочек), гонореи (обнаружение диплококков внутри нейтрофилов в гнойном отделяемом) и лептоспироза (поиск извитых микробов в темном поле на ранних сроках заболевания).

Вирусоскопический метод

Вирусоскопия требует совершенно иного инструментария. Основным инструментом здесь выступает электронная микроскопия, значительно реже применяется люминесцентная. Световая микроскопия в рутинной вирусологии практически не применяется, так как вирусы имеют нанометровые размеры и не видны в обычный микроскоп.

Из этого правила есть немногочисленные исключения. С помощью светового микроскопа можно обнаружить:

1. Крупные вирусы (размером более 200 нм). Например, возбудитель натуральной оспы может быть визуализирован при использовании метода серебрения по Морозову.
2. Косвенные признаки вирусного поражения. К ним относятся проявления цитопатического действия на клетки, а также специфические внутриклеточные включения (внутриядерные или внутрицитоплазматические), которые формируются в инфицированных тканях.

Микроскопическая диагностика паразитов и грибов

Микроскопия считается наиболее эффективным и надежным методом при подозрении на паразитарные заболевания. Объектами исследования здесь выступают простейшие и различные гельминты.

Паразитоскопический метод основан на том, что данные возбудители имеют крупные размеры и обладают очень характерной морфологией. Это основной способ подтверждения таких диагнозов, как малярия, амебиаз, лямблиоз и различные гельминтозы. Технически исследование включает приготовление нативных препаратов, а также мазков с последующей окраской по методу Романовского—Гимзе.

Микроскопия грибов имеет свои особенности. Препараты исследуют как в первозданном (нативном), так и в окрашенном виде. При глубоких микозах часто применяется гистологический метод. Его цель — найти элементы гриба (такие как гифы и споры) прямо в пораженных тканях или органах пациента. Для этого из полученных биоптатов готовят тонкие или ультратонкие срезы, подвергают их специальной окраске (с помощью гистохимических методов) и затем изучают в световой микроскоп.

Вопросы с занятий и экзамена

Что ещё разобрать по теме

• Техника и биохимический механизм окраски бактерий по Граму
• Принципы работы фазово-контрастного и темнопольного микроскопов
• Виды цитопатического действия вирусов на клеточные культуры
• Особенности гистохимической окраски препаратов при системных микозах
• Морфологическая классификация бактерий: кокки, палочки, извитые формы

Другие темы раздела «Микробиологическая диагностика»

Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.