Общая характеристика и виды реакций
Все серологические реакции данной группы базируются на строгом правиле: молекулы комплемента вступают в работу только тогда, когда специфическое антитело находит свой антиген и связывается с ним. До этого момента комплемент остается неактивным.
В лабораторной практике выделяют три основных вида таких реакций:
- Реакция связывания комплемента (РСК). Это наиболее сложная методика, которая требует предельно строгой подготовки всех компонентов перед проведенаем анализа.
- Реакция радиального гемолиза (РРГ). Данный метод технически основан на процессе диффузии компонентов в специальном геле.
- Реакция иммунного прилипания (РИП). Направлена на работу с крупными корпускулярными антигенами и оценку их взаимодействия с клетками.
Механизм реакции связывания комплемента (РСК)
РСК является многоступенчатым тестом. Для ее постановки требуются две независимые системы компонентов, которые вводятся в реакцию последовательно.
Первая (основная) система включает в себя:
- Известный антиген (Аг);
- Исследуемую сыворотку пациента (она может содержать искомые антитела, а может и не содержать их);
- Экзогенный комплемент (С).
Вторая (индикаторная или гемолитическая) система необходима для визуализации результатов. Она состоит из:
- Эритроцитов барана;
- Гемолитической сыворотки (специфических антител, выработанных к эритроцитам барана).
Суть метода заключается в конкуренции за комплемент между основной и индикаторной системами.
Интерпретация результатов РСК
Результат реакции зависит от того, связался ли комплемент на первом этапе с комплексами из сыворотки пациента. Возможны два сценария:
Вариант А: Положительная реакция (пациент болен)
- На первом этапе сыворотка больного содержит специфические антитела.
- Они соединяются с антигеном, образуя прочный иммунный комплекс.
- Добавленный комплемент распознает этот комплекс и жестко с ним связывается (расходуется).
- При добавлении на втором этапе гемолитической системы свободного комплемента в растворе уже нет.
- Итог: Гемолиз отсутствует. Эритроциты барана остаются целыми и просто выпадают в осадок на дно пробирки. Диагноз подтверждается.
Вариант Б: Отрицательная реакция (пациент здоров)
- В сыворотке здорового человека нет нужных антител.
- Иммунный комплекс на первом этапе не формируется.
- Весь добавленный комплемент остается абсолютно свободным.
- После добавления индикаторной системы свободный комплемент атакует сенсибилизированные эритроциты барана.
- Итог: Происходит тотальное разрушение эритроцитов. Наблюдается выраженный гемолиз, жидкость приобретает вид «лаковой крови». Диагноз не подтверждается.
Реакция иммунного прилипания (РИП)
Эта реакция позволяет визуализировать взаимодействие крупных объектов. Ее суть заключается в активации комплемента корпусными антигенами, к которым относятся целые бактериальные клетки или вирусы, предварительно обработанные иммунной сывороткой.
Пошаговый механизм РИП:
- Происходит образование первичного комплекса между корпусным антигеном и антителом.
- Этот комплекс активирует систему комплемента, что приводит к массированной наработке компонента C3b.
- Молекулы C3b оседают на поверхности комплекса и начинают выполнять функцию биологического «клея».
Результат: Корпускулярный антиген, покрытый молекулами C3b, прилипает к мембранам клеток-мишеней, которые имеют соответствующие рецепторы. К таким клеткам относятся эритроциты человека, тромбоциты и макрофаги. Визуально при смешивании таких клеток с иммунными комплексами наблюдается их соединение, которое выглядит как классическая реакция агглютинации.
Парадокс РСК: если гемолиза НЕТ (эритроциты целы, выпали в осадок) — реакция ПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ (антитела есть). Если гемолиз ЕСТЬ («лаковая кровь») — реакция ОТРИЦАТЕЛЬНАЯ (антител нет).
Вопросы с занятий и экзамена
В каком случае система комплемента начинает работать в серологических реакциях?
Активация происходит исключительно в тот момент, когда формируется специфический комплекс «антиген–антитело».
Зачем в РСК нужны эритроциты барана?
Они выступают частью индикаторной системы. Если комплемент остался свободным, он разрушит эритроциты барана, и мы увидим гемолиз.
Какие клетки имеют рецепторы к компоненту C3b?
Специфические рецепторы к C3b присутствуют на поверхности эритроцитов человека, тромбоцитов и макрофагов.
Что представляет собой феномен «лаковой крови» в РСК?
Это визуальное проявление гемолиза эритроцитов барана, которое наблюдается при отрицательном результате анализа, когда в сыворотке нет антител.
Что ещё разобрать по теме
- Точные правила подготовки и титрования компонентов для Реакции связывания комплемента
- Механика диффузии антигенов и антител в геле при постановке реакции радиального гемолиза
- Роль макрофагов и тромбоцитов в очищении организма от иммунных комплексов через рецепторы C3b
- Специфика обработки корпускулярных антигенов иммунными сыворотками
Разберите тему целиком в курсе «Микробиология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Реакции с участием комплемента» и ещё 4 383 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 141 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Иммунодиагностические реакции»
Бесплатные видеоуроки: микробиологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.