Микробиологические методы исследования

Классификация методов диагностики

В современной медицинской практике выделяют ровно семь основных групп методов, которые позволяют точно идентифицировать возбудителя заболевания:

1. Микроскопический (бактериоскопический) — прямое визуальное изучение микроорганизмов под микроскопом.
2. Культуральный (бактериологический или вирусологический) — посев биоматериала на искусственные питательные среды для получения чистой культуры.
3. Серологический (иммунологический) — направлен на поиск специфических антител в сыворотке крови.
4. Аллергологический — основан на постановке кожно-аллергических проб (например, туберкулинодиагностика).
5. Биологический — представляет собой биопробу, при которой материалом заражают лабораторных животных.
6. Молекулярно-генетический — позволяет обнаружить нуклеиновые кислоты микроба (чаще всего с помощью ПЦР).
7. Физико-химический — применяется для выявления специфических химических компонентов микробной клетки.

Особенности применения ключевых методов

Каждый из перечисленных подходов имеет свои строгие правила применения и показания, которые врач должен учитывать при назначении анализов.

• Серологическая диагностика часто выступает в роли основного метода исследования. Для целенаправленного поиска специфических антител к возбудителю применяют такие реакции, как иммуноферментный анализ (ИФА) и непрямая реакция иммунофлюоресценции (непрямая РИФ).
• Бактериологический метод требует особого внимания к срокам забора клинического материала. Например, посев крови (получение гемокультуры) на специальные питательные среды должен проводиться исключительно в лихорадочный период.
• Гистологический метод базируется на микроскопическом исследовании биоптатов пораженных тканей. При использовании классической окраски по Романовскому—Гимзе врач-микробиолог может визуализировать возбудителя прямо в ткани — например, обнаружить характерные ярко-красные цепочки бактерий рода Bartonella.
• Бактериоскопический метод требует правильной подготовки мазков. При исследовании нативной мокроты применяют специфические окраски. Для выявления важнейшего свойства — кислотоустойчивости — используют окраску по Цилю–Нильсену. Также высокую диагностическую ценность показывает люминесцентная микроскопия, для проведения которой мазки предварительно обрабатывают специальными флюорохромными красителями.

Правила забора биоматериала

Успех любого из семи методов напрямую зависит от качества исследуемого материала. В зависимости от клинической картины и предполагаемой локализации инфекционного процесса, в лабораторию могут направляться самые разные субстраты. К основным видам исследуемого материала относятся:

• Мокрота (особенно важна при диагностике респираторных инфекций).
• Промывные воды бронхов.
• Плевральная жидкость.
• Спинномозговая жидкость (ликвор).
• Биоптаты различных тканей.

Принципы специализации лабораторий

Микробиологические лаборатории не являются абсолютно универсальными учреждениями. Их классификация и структура строятся на двух основных критериях: объекте исследования (то есть конкретной группе изучаемых микробов) и применяемых лабораторных методах.

Специализация по исследуемым группам микроорганизмов традиционно делится на основные профили и узкую специализацию. К основным профилям относятся:

• Бактериологические лаборатории (изучают бактерии).
• Вирусологические лаборатории (работают с вирусами).
• Микологические лаборатории (исследуют патогенные грибы).
• Протозоологические лаборатории (специализируются на простейших).

Узкая специализация подразумевает работу лаборатории только с конкретными таксонами или группами возбудителей. В практике существуют отдельные риккетсиозные, хламидийные, туберкулезные и лептоспирозные лаборатории, а также специализированные подразделения для изучения анаэробных инфекций.

Специализация по методам исследования выделяет лаборатории, которые преимущественно используют:

• Классические культуральные (микробиологические) методы.
• Иммунологические методы (постановка различных серологических реакций).
• Молекулярно-генетические методы (ПЦР и другие технологии).

Важно отметить, что на практике очень часто встречается рациональное сочетание методов. Например, выполнение серологической диагностики может успешно и полноценно проводиться на базе классической микробиологической лаборатории.

Вопросы с занятий и экзамена

Что ещё разобрать по теме

• Техника постановки непрямой РИФ и ИФА
• Окраска по Романовскому—Гимзе: механизм и применение
• Особенности культивирования анаэробных инфекций
• Туберкулинодиагностика: виды кожных проб
• Люминесцентная микроскопия с флюорохромными красителями

Другие темы раздела «Микробиологическая диагностика»

Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.