Правила сбора и транспортировки биоматериала
Для рутинных исследований пациент осуществляет сбор материала самостоятельно. Главная проблема преаналитического этапа заключается в том, что при комнатной температуре микрофлора мочи быстро размножается. Это приводит к искусственному завышению количества бактерий и ложноположительным результатам. Согласно регламенту, доставка пробы в лабораторию и начало исследования должны занимать не более 1–2 часов.
Алгоритм самостоятельного сбора:
- Гигиена: необходимо тщательно вымыть руки и область наружных половых органов.
- Тара: используется стерильный контейнер (крышку нужно снимать аккуратно, ни в коем случае не касаясь краев).
- Техника «средней порции»: первая порция мочи спускается в унитаз. Затем мочеиспускание приостанавливается, и контейнер наполняется средней порцией до половины объема. После этого он плотно закрывается.
Альтернативные методы забора применяются редко. Катетеризация не используется для рутинной диагностики из-за высокого риска заноса инфекции. Надлобковая пункция показана только в отдельных, клинически обоснованных случаях.
Техника количественного посева (Метод Голда)
Для выделения чистой культуры микроорганизмов и подсчета бактерий используется секторный посев. В качестве питательных сред применяют CLED-агар (цистин-лактоза-электролит-дефицитный агар) или 5% кровяной агар.
Для работы используется стандартная бактериологическая петля диаметром 2 мм, которая захватывает ровно 0,005 мл биоматериала.
Техника секторного посева:
- Чашку Петри условно делят на 4 сектора: А, I, II и III.
- Сектор А: производят первичный посев мочи густым штрихом (30–40 штрихов).
- Петлю прожигают в пламени горелки.
- Сектор I: делают 4 штриха из сектора А в сектор I.
- Сектор II: аналогично делают 4 штриха из сектора I в сектор II.
- Сектор III: делают 4 штриха из сектора II в сектор III.
После посева чашки отправляют на инкубацию в термостат при температуре $37^\circ\text{C}$ на период от 24 до 72 часов.
Интерпретация количества колоний и клиническая оценка
Оценка степени обсемененности производится путем подсчета выросших колоний по секторам, что позволяет экстраполировать данные на 1 мл мочи. Чем дальше по секторам распространяется рост, тем выше степень бактериурии:
- Рост только в секторе А: низкая и средняя обсемененность (от $<1000$ до $50\,000$ микробных тел в 1 мл).
- Рост в секторах А и I: высокая обсемененность (от $100\,000$ до $1$ млн).
- Рост в секторах А, I и II: очень высокая обсемененность ($5–10$ млн).
- Рост во всех секторах: критическая обсемененность ($100$ млн и более).
Главная клиническая задача — отличить инфекцию от контаминации (загрязнения пробы нормальной микрофлорой).
Критерии дифференциации:
- Контаминация: количество бактерий менее $10^3$ КОЕ/мл, выявляется ассоциация (поликультура) нескольких видов микроорганизмов.
- Сомнительный результат: пограничный титр $5 \times 10^3$ КОЕ/мл. Требует повторного исследования.
- Инфекционный процесс: диагностический порог $\ge 10^4$ КОЕ/мл. Обычно выявляется монокультура возбудителя.
После выделения чистой культуры проводится её идентификация и ставится антибиотикограмма. Динамическое изменение степени бактериурии (снижение титра) используется врачами для контроля эффективности назначенной терапии.
Чтобы легко запомнить принцип оценки роста, используйте правило «волн»: первая волна (только сектор А) — это допустимая флора. Если волна доходит до сектора I — это уже инфекция. Рост до сектора II означает тяжелую обсемененность, а микробный рост во всех четырех секторах — критическую бактериальную нагрузку.
Вопросы с занятий и экзамена
Почему мочу нельзя долго хранить при комнатной температуре?
При комнатной температуре микрофлора мочи очень быстро размножается. Это неминуемо приводит к ложноположительным результатам из-за искусственного завышения количества бактерий.
Можно ли применять катетеризацию для обычного сбора мочи на посев?
Нет, катетеризация не применяется для рутинных микробиологических исследований, так как эта процедура несет высокий риск заноса инфекции в мочевыводящие пути.
Как отличить истинное воспаление от случайного загрязнения пробы?
При контаминации титр бактерий составляет менее 10³ КОЕ/мл и обнаруживается смесь разных микроорганизмов. Истинная инфекция характеризуется высокой бактериурией (от 10⁴ КОЕ/мл), чаще всего представленной монокультурой.
Что ещё разобрать по теме
- Особенности питательных сред: CLED-агар и 5% кровяной агар
- Алгоритм биохимической идентификации выделенной чистой культуры
- Методика постановки антибиотикограммы
- Мониторинг терапии и интерпретация изменения титра бактериурии
Разберите тему целиком в курсе «Микробиология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Микробиологическое исследование мочи» и ещё 4 383 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 141 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Клиническая микробиология»
Бесплатные видеоуроки: микробиологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.