Сроки получения результатов
Скорость выдачи лабораторного ответа напрямую зависит от биологических особенностей микроорганизмов (скорости их роста) и выбранного метода диагностики.
- Экспресс-информация (1,5–2 часа). Самый ранний ответ, который лаборатория может предоставить после поступления биоматериала. Он базируется на микроскопии мазка, окрашенного по Граму. Для высокой информативности требуется значительная обсемененность пробы — порядка $10^4–10^5$ КОЕ/мл. В ответе констатируется лишь морфология микробов (например, грамотрицательные палочки, грамположительные кокки, плесени или дрожжеподобные грибы). Главное клиническое значение этого этапа — возможность немедленно назначить пациенту эмпирическую антибактериальную терапию до получения классического посева.
- Предварительный результат (18–20 часов). Выдается в случаях, когда в первичном материале присутствует монокультура в высокой концентрации. Специалисты могут наложить диски с антибиотиками прямо на чашку Петри с первичным посевом.
- Окончательный результат. Включает полную видовую идентификацию выделенного штамма и развернутую антибиотикограмму. Для аэробов и факультативных анаэробов этот процесс занимает не менее 3–5 суток. Если речь идет о строгих анаэробах, время ожидания увеличивается до 6–8 суток и более.
Количественная оценка и локализация
При работе с условно-патогенными микроорганизмами критически важно оценивать их концентрацию (обычно выражается в КОЕ/мл или КОЕ/г) с обязательным учетом типа исследуемого локуса.
Выделяют локусы и жидкости, которые в норме абсолютно стерильны. К ним относятся кровь, спинномозговая жидкость (ликвор), моча (непосредственно в мочевом пузыре), секрет предстательной железы, слеза, слюна (как чистый секрет слюнных желез) и дыхательные пути ниже уровня голосовой щели. Обнаружение любых бактерий в этих зонах всегда имеет высокое диагностическое значение.
В нестерильных локусах обитает резидентная микрофлора. Для оценки патологии нужно знать ее нормальную концентрацию:
- Слизистая передних отделов носа: концентрация одного вида обычно не превышает $\le 10^2–10^3$ КОЕ/мл.
- Слизистые оболочки в целом: нормальный уровень обсемененности составляет около $10^3$ КОЕ/мл.
- Фекалии: характеризуются крайне высокой концентрацией бактерий — от $10^3$ до $10^{13}$ КОЕ/г.
Как отличить возбудителя от контаминации?
Чтобы установить, является ли выделенный штамм причиной болезни или случайным «гостем» (представителем нормальной флоры или результатом загрязнения пробы), используют ряд критериев этиологической значимости.
Признаки истинного возбудителя инфекции:
- Наблюдается резкое увеличение концентрации одного или двух видов бактерий (выраженное доминирование в посеве).
- Один и тот же вид микроорганизма выделяется повторно при динамическом наблюдении за пациентом.
- Микроорганизм исчезает из локуса по мере клинического выздоровления больного.
- Выделяется полностью идентичный вид у целой группы пациентов, имеющих схожую клиническую картину (характерно для эпидемических вспышек).
Признаки контаминации (загрязнения) пробы:
- Лаборатория выявляет ассоциации из трех и более различных видов микробов.
- Бактерии обнаруживаются в очень низких концентрациях.
- Выделяются представители нормальной микрофлоры, присутствие которых совершенно не характерно для патологического процесса в данном конкретном локусе.
Качество преаналитического этапа
Достоверность микробиологического ответа зависит не только от оснащенности лаборатории, но и от строгого соблюдения правил взятия и транспортировки биоматериала. При явных признаках нарушения преаналитики лаборатория имеет право отвергнуть материал, так как исследование будет нецелесообразным.
- Ошибка при заборе мокроты: Если при первоначальной микроскопии мазка врач-лаборант видит большое количество клеток плоского эпителия щек, но при этом отсутствуют лейкоциты, делается вывод, что в контейнер попала слюна. Такой образец не отражает реального состояния нижних дыхательных путей пациента.
- Ошибка при заборе мочи: Если в анализе мочи выявляется сразу несколько видов бактерий в низком титре ($< 10^3$ КОЕ/мл), это указывает на банальную контаминацию пробы микрофлорой, смытой со слизистых оболочек наружных половых органов. Бактериологическое исследование такого образца проводить не имеет смысла.
- Особенности забора желчи: Наиболее достоверным материалом является желчь, полученная интраоперационно. Если же биоматериал получен путем дуоденального зондирования, высок риск его контаминации флорой верхних отделов желудочно-кишечного тракта и ротоглотки во время прохождения зонда. Стоит отметить, что выделение одного вида микроба из желчи в высоком титре может указывать на серьезную патологию, например, на поддиафрагмальный абсцесс или абсцесс печени.
Динамический мониторинг и эпидемиологическое маркирование
Микробиологическое исследование редко ограничивается однократным посевом. Для объективной оценки требуется динамическое наблюдение. Посевы в динамике проводятся 3–5 раз, а в условиях стационара — повторяются каждые 7–10 дней.
Повторные исследования позволяют уточнить этиологию (подтвердить первоначальный диагноз), оценить длительность персистенции возбудителя в организме и проконтролировать эффективность терапии, сопоставляя чувствительность микроба in vitro с реальным клиническим эффектом.
Для выявления источника внутрибольничного инфицирования и путей передачи инфекции применяется эпидемиологическое маркирование. Оно заключается во внутривидовом типировании выделенных штаммов. Чтобы идентифицировать конкретный госпитальный штамм, определяют его специфические маркеры:
- Антибиотиковары (группировка по спектру устойчивости к антибиотикам).
- Фаговары (группировка по чувствительности к определенным бактериофагам).
- А также биовары, хемовары и серовары.
Правило «Трех Д»: истинный возбудитель Доминирует (в высокой концентрации), сохраняется в Динамике (при повторных посевах) и Делится с другими (выделяется у группы лиц при вспышке).
Вопросы с занятий и экзамена
В каких случаях лаборатория может выдать предварительный результат через 18–20 часов?
Это возможно, если в биоматериале присутствует монокультура микроорганизма в очень высокой обсемененности. В такой ситуации лаборант может наложить диски с антибиотиками непосредственно на чашку с первичным посевом.
Как по результатам первичной микроскопии понять, что вместо мокроты пациент сдал слюну?
В некачественной пробе под микроскопом будет обнаружено большое количество клеток эпителия щек при полном отсутствии лейкоцитов. Результат такого посева не будет отражать состояние нижних дыхательных путей.
Почему желчь, полученная при дуоденальном зондировании, часто дает недостоверные результаты?
При введении дуоденального зонда происходит неизбежная контаминация пробы нормальной микрофлорой ротоглотки и верхних отделов ЖКТ. Для получения наиболее достоверных данных желчь следует забирать интраоперационно.
Что ещё разобрать по теме
- Особенности культивирования и идентификации строгих анаэробов
- Методы внутривидового типирования: фаготипирование и серотипирование
- Правила забора биоматериала из нестерильных локусов (зев, нос, раны)
- Корреляция между чувствительностью микроорганизмов in vitro и клиническим эффектом
Разберите тему целиком в курсе «Микробиология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Оценка результатов микробиологического исследования» и ещё 4 383 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 141 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Клиническая микробиология»
Бесплатные видеоуроки: микробиологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.