Микробиологическое исследование спинномозговой жидкости

Правила получения и особенности транспортировки материала

Достоверность микробиологического исследования спинномозговой жидкости напрямую зависит от качества преаналитического этапа. Забор материала осуществляется врачом с помощью люмбальной пункции или пункции боковых желудочков мозга. Процедура требует неукоснительного соблюдения правил асептики, чтобы исключить контаминацию. Полученный ликвор в объеме 1–2 мл собирают в строго стерильную пробирку.

Критическим фактором успешной диагностики является правильная транспортировка. Главная опасность на этом этапе — охлаждение образца. Ряд патогенов, особенно Neisseria meningitidis (менингококк), обладает высокой чувствительностью к низким температурам и при остывании пробирки подвергается быстрой гибели.

По этой причине доставить материал в лабораторию необходимо в течение 15–20 минут, пока ликвор остается теплым. Для транспортировки применяют специальное оборудование: термосы, грелки или изотермальные ящики, способные поддерживать температуру на уровне 37 °C. Если немедленная доставка по каким-либо причинам невозможна, образец должен храниться в термостате при 37 °C (допускается хранение в течение нескольких часов).

Лабораторная обработка и прямая микроскопия

Первым этапом лабораторного анализа является приготовление мазка для микроскопического исследования.

Стандартный алгоритм подготовки включает обязательное концентрирование клеток и микроорганизмов. Для этого пробирку с ликвором центрифугируют в течение 5 минут при скорости 3500 оборотов в минуту. После завершения центрифугирования надосадочную жидкость удаляют, а из полученного осадка готовят мазок.

Однако из этого правила существует важное исключение. Если поступившая спинномозговая жидкость визуально мутная или в ней присутствует характерная пленка, мазок готовят немедленно, без предварительного центрифугирования.

Микроскопия имеет высокую диагностическую ценность, особенно при гнойных менингитах. Метод позволяет быстро выявить возбудителей туберкулеза, менингококки, а также представителей условно-патогенной флоры, что дает врачу ценную информацию еще до завершения полного бактериологического анализа.

Культуральное исследование (посев ликвора)

Для выделения чистой культуры возбудителя применяется посев на обогащенные питательные среды. В стандартный набор входят 5% кровяной агар, сывороточный агар и тиогликолевая среда. Техника посева заключается в том, что 2–4 капли нативного ликвора или предварительно ресуспензированного осадка наносят на поверхность среды и тщательно растирают шпателем.

Инкубация посевов происходит при температуре 37 °C, но с использованием разных газовых режимов для охвата максимального спектра возможных патогенов:

• Чашка 1: инкубируется в условиях обычной атмосферы.
• Чашка 2: инкубируется в условиях повышенной концентрации углекислого газа ($CO_2$).

Использование углекислого газа строго обосновано: $CO_2$ является мощным стимулятором роста для таких микроорганизмов, как патогенные нейссерии, пневмококки и листерии.

При подозрении на специфические инфекции применяются дополнительные среды. Например, если клиническая картина указывает на инфицирование Haemophilus influenzae, посев обязательно производят на «шоколадный» агар. При появлении видимого роста колоний микробиологи переходят к этапу идентификации выделенного микроорганизма.

Завершение алгоритма и интерпретация результатов

Финальным и важнейшим клиническим этапом анализа является определение чувствительности выделенной микробной культуры к антибиотикам. Если же первоначальный посев не дал роста (отрицательный результат), тактика требует проведения повторного посева через 8–10 дней.

Интерпретация результатов опирается на тот факт, что в норме спинномозговая жидкость стерильна. Следовательно, выделение любого микроорганизма при соблюдении правил забора расценивается как патология, а сам микроб признается этиологическим фактором заболевания.

Особый подход требуется при диагностике вторичных менингитов. Если воспаление мозговых оболочек возникло как осложнение уже имеющихся гнойных процессов (таких как отит, синусит, флегмона или абсцесс), клиницист обязан обеспечить микробиологическое исследование первичного очага инфекции. Главная цель этого мероприятия — обнаружение и сопоставление идентичных штаммов возбудителя в первичном гнойном очаге и в ликворе.

Вопросы с занятий и экзамена

Что ещё разобрать по теме

• Техника и правила проведения люмбальной пункции.
• Определение чувствительности выделенной культуры к антибиотикам.
• Особенности посева на «шоколадный» агар для H. influenzae.
• Микробиологическое исследование первичных гнойных очагов при вторичных менингитах.
• Морфология и культуральные свойства Neisseria meningitidis.

Другие темы раздела «Клиническая микробиология»

Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.