Бактериологический анализ мочи

Техника количественного посева (Метод Голда)

Для того чтобы выделить чистую культуру микроорганизмов и провести точный количественный подсчет бактерий в исследуемом материале, в микробиологической практике применяют секторный посев, который также известен как метод Голда. В качестве питательной базы для выращивания бактерий традиционно выбирают специализированные среды: цистин-лактоза-электролит-дефицитный агар (сокращенно CLED-агар) или же пятипроцентный кровяной агар.

Главным рабочим инструментом при выполнении данного анализа выступает стандартная бактериологическая петля. Ее диаметр составляет ровно 2 мм, что позволяет лаборанту захватывать строго определенный объем жидкости — ровно 0,005 мл мочи.

Процедура посева строго регламентирована и включает следующие последовательные этапы:

1. Пространство чашки Петри мысленно разбивают на четыре отдельные зоны: стартовый сектор А и последующие сектора, обозначаемые римскими цифрами I, II и III.
2. В секторе А осуществляют первичный посев доставленного образца мочи, нанося от тридцати до сорока плотных штрихов по поверхности агара.
3. После этого бактериологическую петлю обязательно прокаливают в пламени горелки для полного уничтожения оставшихся на ней микробов.
4. Из первичного сектора А проводят ровно четыре штриха в соседнюю зону I.
5. Аналогичным образом делают четыре штриха из зоны I в зону II.
6. Завершают процесс переноса материала четырьмя штрихами из зоны II в финальную зону III.

Засеянные таким образом чашки Петри помещают в термостат, где постоянно поддерживается температура 37 °C. Время инкубации посевов варьирует от одних до трех суток (от 24 до 72 часов).

Роль бактерий рода Proteus в патологии мочевыводящих путей

Бактерии, относящиеся к роду Proteus, часто выступают виновниками тяжелых инфекционных процессов в мочевыводящих путях. В норме эти микроорганизмы являются естественными представителями факультативной микрофлоры влагалища и толстого кишечника человека. Кроме того, их обнаружение в сточных водах служит важным санитарным индикатором фекального загрязнения окружающей среды.

Ключевым фактором вирулентности этих бактерий при поражении мочевыделительной системы является их способность вырабатывать специфический фермент — уреазу. Механизм патогенного действия и последующего камнеобразования выглядит следующим образом:

• Выделяемая бактериями уреаза активно расщепляет мочевину, которая в норме присутствует в моче.
• В результате этой биохимической реакции в большом количестве высвобождается аммиак.
• Накопление аммиака приводит к резкому защелачиванию среды, то есть к значимому повышению уровня pH мочи.
• В щелочной среде резко падает растворимость солей магния и кальция.
• Конечным итогом этого патологического каскада становится кристаллизация солей и формирование почечных камней.

Важно отметить, что после перенесенной инфекции, вызванной протеем, протективный (защитный) иммунитет у пациента не формируется, что делает вполне возможными повторные эпизоды заболевания.

Идентификация и свойства протея

Для точной постановки диагноза бактериологический метод требует тщательной идентификации возбудителя. Первичный посев осуществляют на лактозосодержащие дифференциальные питательные среды. Поскольку бактерии рода Proteus обладают крайне выраженной биохимической активностью, их отличают от других представителей семейства Enterobacteriaceae по целому ряду специфических признаков.

К важнейшим дифференциальным свойствам протея относятся:

• Способность продуцировать ферменты фенилаланиндезаминазу и уреазу.
• Активное выделение сероводорода в процессе жизнедеятельности.
• Способность разжижать желатин.
• Отсутствие ферментации лактозы (это ключевой отрицательный признак).

Особое диагностическое значение имеет метод Шукевича: посев производят непосредственно в конденсационную воду, скапливающуюся на скошенном агаре. Это позволяет визуально выявить характерный «ползучий» рост, который присущ именно данным бактериям.

Антигенная структура микроорганизма представлена соматическим O-антигеном и жгутиковым H-антигеном. Сами бактерии отличаются высокой устойчивостью во внешней среде: они способны выживать в слабых растворах дезинфектантов и фенола, а также без проблем переносят термическое воздействие до 60 °C на протяжении целого часа.

Для лечения протейных инфекций применяют специфический коли-протейный бактериофаг или антибиотики, однако последние назначаются строго после получения результатов антибиотикограммы. Специфическая профилактика (вакцинация) против этих возбудителей на сегодняшний день не разработана.

Бактериологическое подтверждение при других инфекциях

Помимо анализа мочи, бактериологические методы критически важны для диагностики и контроля лечения других инфекционных состояний. Например, при развитии реактивного артрита на фоне перенесенной кишечной инфекции, этиотропная терапия назначается исключительно при наличии лабораторного подтверждения. Таким подтверждением служит положительный бактериологический посев кала или же выявление специфических антител к возбудителям кишечной группы в диагностических титрах. В качестве препаратов первой линии в таких случаях используют антибиотики из группы аминогликозидов (амикацин вводится внутривенно, также применяется гентамицин). Альтернативной группой служат фторхинолоны, однако в педиатрической практике действует важное ограничение: их применение разрешено строго для детей старше 12 лет.

В случае респираторных заболеваний (например, при оценке исходов химиотерапии) результат также формулируется на основе лабораторных данных. Если до начала лечения у пациента была зафиксирована положительная микроскопия, исход регистрируется как «эффективный курс химиотерапии, подтвержденный микроскопией мокроты». При наличии роста бактерий на плотных или жидких питательных средах формулировка меняется на «подтвержденный посевом мокроты». Если же изначально были положительны оба диагностических теста, в медицинской документации регистрируется исход, подтвержденный и микроскопией, и посевом мокроты.

Вопросы с занятий и экзамена

Что ещё разобрать по теме

• Особенности роста микроорганизмов на CLED-агаре и 5% кровяном агаре.
• Антигенная структура энтеробактерий: роль O- и H-антигенов.
• Принципы постановки антибиотикограммы для выбора этиотропной терапии.
• Применение коли-протейного бактериофага в клинической практике.
• Интерпретация результатов посева мокроты на жидкие и плотные питательные среды.

Другие темы раздела «Дополнительные темы»

Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.