Сбор и подготовка биологического материала
Для того чтобы корректно провести выявление антител, специалисту необходимо получить жидкую часть крови пациента, лишенную собственных форменных элементов. Процесс подготовки включает два основных этапа:
- Забор материала. В процедурном кабинете осуществляется забор венозной крови больного. Для полноценного проведения реакции требуется объем, равный 3–4 мл.
- Получение сыворотки. Собранную кровь подвергают обязательному центрифугированию. Эта физическая процедура необходима для того, чтобы отделить клеточный осадок. В результате центрифугирования исследователь получает сыворотку, которая и будет служить основным материалом пациента для проведения анализа (использование плазмы, гемолизата или осадка в данной методике не предусмотрено).
Методика и техника проведения реакции
Сама процедура типирования требует внимательности и соблюдения временных интервалов. Ход работы выглядит следующим образом:
- Вначале на специально маркированную белую тарелку наносят по одной крупной капле сыворотки обследуемого больного.
- К сыворотке добавляют стандартные эритроциты известных групп — I, II и III. Важно помнить, что в качестве реагента выступает именно эритроцитарная масса известной группы, а не стандартные сыворотки или цоликлоны (анти-А и анти-В).
- Строгая пропорция: объем добавляемой капли стандартных эритроцитов должен быть ровно в пять раз меньше объема нанесенной капли исследуемой сыворотки.
- Реагенты аккуратно перемешивают, используя для этого угол чистого предметного стекла.
- После смешивания тарелку необходимо непрерывно покачивать на протяжении 3 минут.
- Затем в реагирующую смесь добавляют одну каплю изотонического раствора NaCl.
- Окончательная оценка результата (наличия или отсутствия склеивания клеток) проводится суммарно через 5 минут от начала реакции.
Интерпретация результатов исследования
Оценка групповой принадлежности базируется на фиксации феномена агглютинации — специфического склеивания стандартных эритроцитов под воздействием антител, содержащихся в сыворотке больного.
- Группа I(0): В сыворотке присутствуют антитела, вызывающие агглютинацию со стандартными эритроцитами II(A) и III(B). С клетками I(0) реакция отсутствует.
- Группа II(A): Сыворотка дает агглютинацию исключительно со стандартными эритроцитами III(B). При добавлении эритроцитов I(0) и II(A) склеивания не происходит.
- Группа III(B): Агглютинация четко фиксируется только с эритроцитами II(A). В каплях со стандартными эритроцитами I(0) и III(B) реакция полностью отсутствует.
- Группа IV(AB): В сыворотке отсутствуют групповые антитела, поэтому агглютинация отсутствует со всеми стандартными эритроцитами (I, II и III).
Сыворотка никогда не дает агглютинацию с эритроцитами своей же группы и группы I(0).
Вопросы с занятий и экзамена
Какой именно материал пациента нужен для этого метода?
Для исследования необходима чистая сыворотка пациента, которую получают путем центрифугирования 3–4 мл венозной крови.
В каком соотношении нужно смешивать реагенты?
Смешивание происходит в пропорции 5:1. Капля сыворотки больного должна быть в 5 раз больше капли стандартных эритроцитов.
Когда добавляют изотонический раствор и зачем он нужен?
Каплю изотонического раствора NaCl добавляют после 3 минут покачивания тарелки. Окончательный результат оценивают на 5-й минуте.
Что ещё разобрать по теме
- Механизмы центрифугирования и отличия сыворотки от плазмы
- Причины ложной агглютинации и роль изотонического раствора NaCl
- Ошибки при несоблюдении пропорций реагентов
- Сравнение метода стандартных эритроцитов с использованием анти-А и анти-В реагентов
Разберите тему целиком в курсе «Общая хирургия»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Определение группы крови по стандартным отмытым эритроцитам» и ещё 3 335 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 70 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «ГЛАВА 6. ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ»
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.