Классический метод: реакция конглютинации
Перед проведением анализа необходимо знать группу крови пациента по системе AB0. Для исследования используют две разные серии сывороток анти-Rh, которые совместимы с группой крови исследуемого.
Процедура выполняется в чашке Петри:
- В первый ряд наносят по три капли сыворотки одной серии, во второй — другой серии.
- Добавляют исследуемую кровь (пропорция сыворотки к крови 10:1 или 5:1).
- В качестве контроля активности вносят стандартные Rh+ эритроциты.
- Для контроля специфичности добавляют стандартные Rh- эритроциты.
- Капли аккуратно перемешивают, закрывают крышкой и помещают на водяную баню при температуре 46–48 °C на 10 минут.
Оценка результатов
Сначала оценивают контрольные пробы: с положительными эритроцитами агглютинация должна произойти, а с отрицательными — отсутствовать.
Интерпретация результатов пробы с кровью пациента:
- Если агглютинация есть в обеих сериях сывороток, кровь считается резус-положительной (Rh+).
- Если склеивания эритроцитов не произошло, кровь резус-отрицательная (Rh-).
Важно: в отличие от определения группы AB0, при оценке резус-принадлежности категорически запрещено добавлять физиологический раствор в процессе реакции, так как это может дать ложноотрицательный результат.
Частые ошибки при исследовании
Искажение результатов может быть следствием нарушений техники выполнения:
- Использование сывороток анти-Rh со сниженной активностью.
- Неправильное соотношение объемов сыворотки и крови.
- Нарушение температурного режима (недостаточный или избыточный нагрев).
- Сокращение времени инкубации (менее 10 минут).
- Добавление раствора NaCl во время реакции конглютинации.
- Игнорирование контрольных проб на активность и специфичность.
- Групповая несовместимость применяемых реагентов.
Экспресс-метод определения
Данный способ применяется в экстренных случаях и не требует подогрева. Используется сыворотка анти-Rh группы IV(AB), разведенная раствором альбумина (20–30%) или декстрана (30–33%). Коллоидная среда обеспечивает склеивание эритроцитов при комнатной температуре.
Рядом с каплей реагента наносят контрольную резус-отрицательную сыворотку без антител. Добавляют исследуемую кровь (ее должно быть в 2–3 раза меньше сыворотки), перемешивают 3–4 минуты. Затем вносят по капле физраствора и через 5 минут оценивают результат.
Если реакция сомнительная (агглютинация в обеих каплях) или определить резус невозможно, при экстренном переливании используют только резус-отрицательную кровь.
Вопросы с занятий и экзамена
Почему нельзя добавлять физиологический раствор при классическом методе?
Добавление изотонического раствора хлорида натрия нарушает реакцию конглютинации и может привести к ложноотрицательному результату.
Зачем в экспресс-методе нужен раствор декстрана или альбумина?
Коллоидная среда из этих растворов способствует агрегации эритроцитов без необходимости использования водяной бани.
Что делать при экстренном переливании, если результат сомнительный?
В такой ситуации переливают только резус-отрицательную кровь. В крайнем случае допускается переливание Rh+ крови, но строго после пробы на индивидуальную совместимость.
Что ещё разобрать по теме
- Механизм реакции конглютинации
- Причины ложной агглютинации
- Свойства коллоидных сред (декстрана и альбумина)
- Проба на совместимость по резус-фактору перед гемотрансфузией
Разберите тему целиком в курсе «Общая хирургия»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Определение резус-фактора» и ещё 3 335 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 70 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «ГЛАВА 6. ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ»
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.